ជំងឺរលាកសន្លាក់ឆ្អឹង (OA) គឺជាជំងឺមួយក្នុងចំនោមជំងឺសន្លាក់ឆ្អឹងរ៉ាំរ៉ៃដែលប៉ះពាល់ដល់មនុស្សដែលមានអាយុលើសពី 65 ឆ្នាំ
1] ជាទូទៅ អ្នកជំងឺ OA ត្រូវបានគេធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យថាមានឆ្អឹងខ្ចីដែលខូច រលាក synovium និង chondrocytes ដែលត្រូវបានបំផ្លាញ ដែលបង្កឱ្យមានការឈឺចាប់ និងទុក្ខព្រួយខាងរាងកាយ [
2] ការឈឺចាប់សន្លាក់គឺបណ្តាលមកពីការចុះខ្សោយនៃឆ្អឹងខ្ចីក្នុងសន្លាក់ដោយការរលាក ហើយនៅពេលដែលឆ្អឹងខ្ចីត្រូវបានខូចខាតយ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរ ឆ្អឹងអាចប៉ះទង្គិចគ្នាដែលបណ្តាលឱ្យមានការឈឺចាប់ដែលមិនអាចទ្រាំទ្របាន និងការលំបាកខាងរាងកាយ [
3] ការចូលរួមរបស់អ្នកសម្របសម្រួលរលាកដែលមានរោគសញ្ញាដូចជាការឈឺចាប់ ហើម និងរឹងនៃសន្លាក់ត្រូវបានកត់ត្រាយ៉ាងល្អ។ នៅក្នុងអ្នកជំងឺ OA, cytokines រលាកដែលបណ្តាលឱ្យសំណឹកនៃឆ្អឹងខ្ចីនិងឆ្អឹង subchondral ត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងសារធាតុរាវ synovial [
4] ពាក្យបណ្តឹងសំខាន់ពីរដែលអ្នកជំងឺ OA ជាទូទៅមានគឺការឈឺចាប់និងការរលាក synovial ។ ដូច្នេះគោលដៅចម្បងនៃការព្យាបាល OA បច្ចុប្បន្នគឺដើម្បីបន្ថយការឈឺចាប់ និងការរលាក។ [
5] ទោះបីជាការព្យាបាល OA ដែលមាន រួមទាំងថ្នាំដែលមិនមែនជាស្តេរ៉ូអ៊ីត និងថ្នាំស្តេរ៉ូអ៊ីត បានបង្ហាញឱ្យឃើញពីប្រសិទ្ធភាពក្នុងការបន្ថយការឈឺចាប់ និងការរលាកក៏ដោយ ការប្រើប្រាស់រយៈពេលយូរនៃថ្នាំទាំងនេះមានផលវិបាកធ្ងន់ធ្ងរដល់សុខភាពដូចជាជំងឺបេះដូង សរសៃឈាម ក្រពះ ពោះវៀន និងមុខងារតម្រងនោម [
6] ដូច្នេះ ឱសថដែលមានប្រសិទ្ធភាពជាង ជាមួយនឹងផលប៉ះពាល់តិចជាងមុន ត្រូវតែបង្កើតសម្រាប់ការព្យាបាលជំងឺរលាកសន្លាក់ឆ្អឹង។
ផលិតផលសុខភាពធម្មជាតិ កំពុងតែពេញនិយមខ្លាំង មានសុវត្ថិភាព និងងាយស្រួលរកទិញ [
7] ឱសថបុរាណកូរ៉េ បានបង្ហាញប្រសិទ្ធភាពប្រឆាំងនឹងការរលាកជាច្រើន រួមទាំងជំងឺរលាកសន្លាក់ [
8] Aucklandia lappa DC ។ ត្រូវបានគេស្គាល់ថាសម្រាប់លក្ខណៈសម្បត្តិឱសថរបស់វា ដូចជាការបង្កើនចរន្តឈាមរបស់ qi សម្រាប់បំបាត់ការឈឺចាប់ និងបន្ធូរក្រពះ ហើយត្រូវបានគេប្រើជាប្រពៃណីជាថ្នាំបំបាត់ការឈឺចាប់ធម្មជាតិ [
9] របាយការណ៍ពីមុនបានបង្ហាញថា A. lappa មានសារធាតុប្រឆាំងនឹងការរលាក [
10,
11] ថ្នាំបំបាត់ការឈឺចាប់ [
12], ប្រឆាំងមហារីក [
13] និង gastroprotective [
14] ផលប៉ះពាល់។ សកម្មភាពជីវសាស្រ្តផ្សេងៗរបស់ A. lappa គឺបណ្តាលមកពីសមាសធាតុសកម្មសំខាន់ៗរបស់វា៖ costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone និង costuslactone [
15] ការសិក្សាពីមុនបានអះអាងថា costunolide បានបង្ហាញពីលក្ខណៈសម្បត្តិប្រឆាំងនឹងការរលាកនៅក្នុង lipopolysaccharide (LPS) ដែលបណ្តាលឱ្យ macrophages តាមរយៈបទប្បញ្ញត្តិនៃ NF-kB និងផ្លូវប្រូតេអ៊ីនឆក់កំដៅ [
16,
17] ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ គ្មានការសិក្សាណាមួយបានស៊ើបអង្កេតសកម្មភាពសក្តានុពលរបស់ A. lappa សម្រាប់ការព្យាបាល OA នោះទេ។ ការស្រាវជ្រាវបច្ចុប្បន្នបានស៊ើបអង្កេតលើឥទ្ធិពលព្យាបាលរបស់ A. lappa ប្រឆាំងនឹង OA ដោយប្រើ (monosodium-iodoacetate) MIA និងគំរូសត្វកកេរដែលបណ្ដាលមកពីអាស៊ីតអាសេទិក។
Monosodium-iodoacetate (MIA) ត្រូវបានគេស្គាល់ថាត្រូវបានគេប្រើដើម្បីបង្កើតអាកប្បកិរិយាឈឺចាប់ជាច្រើននិងលក្ខណៈរោគសាស្ត្រនៃ OA នៅក្នុងសត្វ [
18,
19,
20] នៅពេលចាក់ចូលទៅក្នុងសន្លាក់ជង្គង់ MIA រំខានដល់ការរំលាយអាហារ chondrocyte និងបង្កឱ្យមានការរលាក និងរោគសញ្ញារលាក ដូចជាឆ្អឹងខ្ចី និងសំណឹកឆ្អឹង subchondral ដែលជារោគសញ្ញាសំខាន់នៃ OA [
18] ការឆ្លើយតបការក្រហាយដែលបណ្តាលមកពីអាស៊ីតអាសេទិកត្រូវបានគេចាត់ទុកថាជាការក្លែងធ្វើនៃការឈឺចាប់ផ្នែកខាងក្នុងសត្វដែលការឈឺចាប់រលាកអាចត្រូវបានវាស់វែងជាបរិមាណ [
19] បន្ទាត់កោសិកា macrophage កណ្តុរ RAW264.7 ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងពេញនិយមដើម្បីសិក្សាពីការឆ្លើយតបកោសិកាចំពោះការរលាក។ នៅពេលធ្វើឱ្យសកម្មជាមួយ LPS, RAW264 macrophages ធ្វើឱ្យផ្លូវរលាកសកម្ម និងលាក់បាំងអន្តរការីរលាកជាច្រើនដូចជា TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, និង IL-6 [
20] ការសិក្សានេះបានវាយតម្លៃលើឥទ្ធិពលប្រឆាំងនឹងការរលាក និងប្រឆាំងនឹងការរលាកនៃ A. lappa ប្រឆាំងនឹង OA នៅក្នុងគំរូសត្វ MIA គំរូសត្វដែលបណ្ដាលមកពីអាស៊ីតអាសេទិក និងកោសិកា RAW264.7 ដែលសកម្ម LPS ។
2. សម្ភារៈនិងវិធីសាស្រ្ត
២.១. សម្ភារៈរុក្ខជាតិ
ឫសស្ងួតរបស់ A. lappa DC ។ ប្រើក្នុងការពិសោធន៍ត្រូវបានទិញពីក្រុមហ៊ុន Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (ទីក្រុងសេអ៊ូល ប្រទេសកូរ៉េ)។ វាត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយសាស្រ្តាចារ្យ Donghun Lee នាយកដ្ឋានឱសថសាស្រ្ត វេជ្ជបណ្ឌិត Col. of Korean Medicine សាកលវិទ្យាល័យ Gachon ហើយលេខសំណាកប័ណ្ណត្រូវដាក់លេខ 18060301។
២.២. ការវិភាគ HPLC នៃ A. lappa Extract
A. lappa ត្រូវបានចម្រាញ់ចេញដោយប្រើឧបករណ៍ច្រាលទឹកចេញ (ទឹកចម្រោះ, 3 ម៉ោងនៅ 100 ° C) ។ ដំណោះស្រាយដែលបានស្រង់ចេញត្រូវបានត្រង និងខាប់ដោយប្រើឧបករណ៍រំហួតសម្ពាធទាប។ ចំរាញ់ចេញពី lappa មានទិន្នផល 44.69% បន្ទាប់ពីស្ងួតត្រជាក់ក្រោម −80 °C។ ការវិភាគ Chromatographic នៃ A. lappa ត្រូវបានធ្វើឡើងជាមួយ HPLC ដែលតភ្ជាប់ដោយប្រើប្រព័ន្ធ 1260 InfinityⅡ HPLC (Agilent, Pal Alto, CA, USA) ។ សម្រាប់ការបំបែកជាពណ៌ក្រូម៉ាត ជួរឈរ EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ត្រូវបានប្រើនៅសីតុណ្ហភាព 35 °C។ សរុប 100 មីលីក្រាមនៃគំរូត្រូវបានពនឺក្នុង 10 mL នៃ 50% មេតាណុល និង sonicated សម្រាប់ 10 នាទី។ គំរូត្រូវបានត្រងដោយប្រើតម្រងសឺរាុំង (Waters Corp., Milford, MA, USA) នៃ 0.45 μm។ សមាសភាពដំណាក់កាលចល័តគឺ 0.1% អាស៊ីតផូស្វ័រ (A) និង acetonitrile (B) ហើយជួរឈរត្រូវបានដកចេញដូចខាងក្រោម: 0-60 នាទី, 0%; 60-65 នាទី, 100%; 65–67 នាទី, 100%; 67–72 នាទី, 0% សារធាតុរំលាយ B ជាមួយនឹងអត្រាលំហូរ 1.0 មីលីលីត្រ/នាទី។ សារធាតុរាវត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅ 210 nm ដោយប្រើបរិមាណចាក់ 10 μL។ ការវិភាគត្រូវបានអនុវត្តជាបីដង។
២.៣. ជម្រកសត្វ និងការគ្រប់គ្រង
កណ្តុរឈ្មោល Sprague-Dawley (SD) ដែលមានអាយុ 5 សប្តាហ៍ និងកណ្តុរ ICR ឈ្មោលដែលមានអាយុ 6 សប្តាហ៍ត្រូវបានទិញពី Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) ។ សត្វត្រូវបានរក្សាទុកនៅក្នុងបន្ទប់ដោយប្រើសីតុណ្ហភាពថេរ (22 ± 2 ° C) និងសំណើម (55 ± 10%) និងវដ្តពន្លឺ / ងងឹត 12/12 ម៉ោង។ សត្វត្រូវបានស្គាល់ពីស្ថានភាពនេះជាងមួយសប្តាហ៍មុនពេលការពិសោធន៍ចាប់ផ្តើម។ សត្វមានការផ្គត់ផ្គង់ចំណី និងទឹក។ ច្បាប់សីលធម៌បច្ចុប្បន្នសម្រាប់ការថែទាំ និងការគ្រប់គ្រងសត្វនៅសាកលវិទ្យាល័យ Gachon (GIACUC-R2019003) ត្រូវបានអនុវត្តយ៉ាងតឹងរ៉ឹងនៅក្នុងគ្រប់នីតិវិធីពិសោធន៍សត្វទាំងអស់។ ការសិក្សានេះត្រូវបានរចនាឡើងដោយអ្នកស៊ើបអង្កេតពិការភ្នែក និងការកាត់ក្តីស្របគ្នា។ យើងបានអនុវត្តតាមវិធីសាស្ត្រ euthanasia ដោយយោងតាមការណែនាំរបស់គណៈកម្មាធិការសីលធម៌ពិសោធន៍សត្វ។
២.៤. ការចាក់ថ្នាំ និងការព្យាបាល MIA
កណ្តុរត្រូវបានបែងចែកដោយចៃដន្យជា 4 ក្រុមគឺ sham, control, indomethacin និង A. lappa ។ ដោយត្រូវបានចាក់ថ្នាំស្ពឹកជាមួយនឹងល្បាយ isofluorane O2 2% កណ្តុរត្រូវបានចាក់ដោយប្រើ 50 μL នៃ MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intra-articularly into the knee joints ដើម្បីនាំទៅរក OA ពិសោធន៍។ ការព្យាបាលត្រូវបានធ្វើឡើងដូចខាងក្រោម៖ ការគ្រប់គ្រង និងក្រុមខ្មាស់អៀនត្រូវបានរក្សាទុកតែជាមួយរបបអាហារមូលដ្ឋាន AIN-93G ប៉ុណ្ណោះ។ មានតែក្រុម indomethacin ប៉ុណ្ណោះដែលត្រូវបានផ្តល់ដោយ indomethacin (3 mg/kg) បញ្ចូលទៅក្នុងរបបអាហារ AIN-93G និងក្រុម A. lappa 300 mg/kg ត្រូវបានផ្តល់ទៅឱ្យរបបអាហារ AIN-93G ដែលបន្ថែមដោយ A. lappa (300 mg/kg)។ ការព្យាបាលត្រូវបានបន្តសម្រាប់រយៈពេល 24 ថ្ងៃចាប់តាំងពីថ្ងៃនៃការបញ្ចូល OA ក្នុងអត្រា 15-17 ក្រាមក្នុងមួយទំងន់រាងកាយ 190-210 ក្រាមជារៀងរាល់ថ្ងៃ។
២.៥. ការវាស់វែងទម្ងន់
បន្ទាប់ពីការដាក់បញ្ចូល OA ការវាស់វែងសមត្ថភាពផ្ទុកទម្ងន់នៃអវយវៈខាងក្រោយរបស់សត្វកណ្តុរត្រូវបានអនុវត្តជាមួយនឹង incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) ដូចដែលបានគ្រោងទុក។ ការចែកចាយទម្ងន់នៅលើអវយវៈខាងក្រោយត្រូវបានគណនា៖ សមត្ថភាពផ្ទុកទម្ងន់ (%)