ជំងឺរលាកសន្លាក់ឆ្អឹង (OA) គឺជាជំងឺសន្លាក់ឆ្អឹងរ៉ាំរ៉ៃមួយប្រភេទ ដែលប៉ះពាល់ដល់ប្រជាជនដែលមានអាយុលើសពី 65 ឆ្នាំ [
1]។ ជាទូទៅ អ្នកជំងឺ OA ត្រូវបានគេធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យថាមានឆ្អឹងខ្ចីដែលខូច ភ្នាសរំអិលនៃសន្លាក់ឆ្អឹងរលាក និងកោសិកា chondrocytes ដែលរលួយ ដែលបង្កឱ្យមានការឈឺចាប់ និងភាពតានតឹងខាងរាងកាយ [
2]. ការឈឺចាប់ដោយសារជំងឺរលាកសន្លាក់ភាគច្រើនបណ្តាលមកពីការចុះខ្សោយនៃឆ្អឹងខ្ចីនៅក្នុងសន្លាក់ដោយការរលាក ហើយនៅពេលដែលឆ្អឹងខ្ចីត្រូវបានខូចខាតយ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរ ឆ្អឹងអាចប៉ះទង្គិចគ្នាបណ្តាលឱ្យមានការឈឺចាប់ដែលមិនអាចទ្រាំទ្របាន និងការលំបាកខាងរាងកាយ។
3]។ ការចូលរួមរបស់អន្តរការីរលាកដែលមានរោគសញ្ញាដូចជាការឈឺចាប់ ហើម និងរឹងនៃសន្លាក់ត្រូវបានកត់ត្រាទុកយ៉ាងល្អ។ ចំពោះអ្នកជំងឺ OA សារធាតុ cytokines រលាក ដែលបណ្តាលឱ្យមានការសឹករិចរិលនៃឆ្អឹងខ្ចី និងឆ្អឹង subchondral ត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងសារធាតុរាវ synovial [
4]។ ការត្អូញត្អែរធំៗពីរដែលអ្នកជំងឺ OA ជាទូទៅមានគឺការឈឺចាប់ និងការរលាកនៃសន្លាក់ឆ្អឹង។ ដូច្នេះគោលដៅចម្បងនៃការព្យាបាល OA បច្ចុប្បន្នគឺដើម្បីបន្ថយការឈឺចាប់ និងការរលាក។
5]។ ទោះបីជាការព្យាបាល OA ដែលមាន រួមទាំងថ្នាំដែលមិនមែនជាស្តេរ៉ូអ៊ីត និងថ្នាំស្តេរ៉ូអ៊ីត បានបង្ហាញពីប្រសិទ្ធភាពក្នុងការបំបាត់ការឈឺចាប់ និងការរលាកក៏ដោយ ការប្រើប្រាស់ថ្នាំទាំងនេះរយៈពេលវែងមានផលវិបាកធ្ងន់ធ្ងរដល់សុខភាពដូចជា មុខងារបេះដូង ក្រពះពោះវៀន និងតម្រងនោមមិនប្រក្រតី។
6ដូច្នេះ ថ្នាំដែលមានប្រសិទ្ធភាពជាងមុនជាមួយនឹងផលប៉ះពាល់តិចជាងមុនត្រូវតែត្រូវបានបង្កើតឡើងសម្រាប់ការព្យាបាលជំងឺរលាកសន្លាក់ឆ្អឹង។
ផលិតផលសុខភាពធម្មជាតិកំពុងមានប្រជាប្រិយភាពកាន់តែខ្លាំងឡើងដោយសារតែមានសុវត្ថិភាព និងងាយស្រួលរកទិញ [
7]។ ឱសថបុរាណកូរ៉េបានបង្ហាញឱ្យឃើញពីប្រសិទ្ធភាពប្រឆាំងនឹងជំងឺរលាកជាច្រើន រួមទាំងជំងឺរលាកសន្លាក់ផងដែរ [
8]។ Aucklandia lappa DC. ត្រូវបានគេស្គាល់ដោយសារលក្ខណៈសម្បត្តិឱសថរបស់វា ដូចជាការបង្កើនចរន្តឈាមរបស់ qi សម្រាប់បំបាត់ការឈឺចាប់ និងធ្វើឱ្យក្រពះស្ងប់ ហើយត្រូវបានគេប្រើជាប្រពៃណីជាថ្នាំបំបាត់ការឈឺចាប់ធម្មជាតិ [
9]។ របាយការណ៍មុនៗបង្ហាញថា A. lappa មានឥទ្ធិពលប្រឆាំងនឹងការរលាក [
10,
11], ថ្នាំបំបាត់ការឈឺចាប់ [
12], ប្រឆាំងមហារីក [
13] និងការពារក្រពះពោះវៀន [
14] ផលប៉ះពាល់។ សកម្មភាពជីវសាស្រ្តផ្សេងៗរបស់ A. lappa គឺបណ្តាលមកពីសមាសធាតុសកម្មសំខាន់ៗរបស់វា៖ costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone និង costuslactone [
15]។ ការសិក្សាមុនៗអះអាងថា costunolide បានបង្ហាញពីលក្ខណៈសម្បត្តិប្រឆាំងនឹងការរលាកនៅក្នុង lipopolysaccharide (LPS) ដែលបានបង្កើត macrophages តាមរយៈការគ្រប់គ្រង NF-kB និងផ្លូវប្រូតេអ៊ីនឆក់កំដៅ [
16,
17]។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ គ្មានការសិក្សាណាមួយបានស៊ើបអង្កេតពីសកម្មភាពដែលអាចកើតមានរបស់ A. lappa សម្រាប់ការព្យាបាលជំងឺ OA នោះទេ។ ការស្រាវជ្រាវបច្ចុប្បន្ននេះបានស៊ើបអង្កេតពីប្រសិទ្ធភាពព្យាបាលរបស់ A. lappa ប្រឆាំងនឹង OA ដោយប្រើ (monosodium-iodoacetate) MIA និងគំរូសត្វកកេរដែលបង្កឡើងដោយអាស៊ីតអាសេទិក។
ម៉ូណូសូដ្យូម-អ៊ីយ៉ូដូអាសេតាត (MIA) ត្រូវបានគេស្គាល់ថាត្រូវបានគេប្រើដើម្បីបង្កើតឥរិយាបថឈឺចាប់ជាច្រើន និងលក្ខណៈពិសេសខាងរោគសាស្ត្រនៃជំងឺរលាកសន្លាក់ឆ្អឹង (OA) ចំពោះសត្វ [
18,
19,
20]។ នៅពេលចាក់ចូលទៅក្នុងសន្លាក់ជង្គង់ MIA ធ្វើឱ្យខូចដល់ដំណើរការមេតាបូលីសនៃកោសិកា chondrocyte និងបង្កឱ្យមានការរលាក និងរោគសញ្ញារលាក ដូចជាការសឹកឆ្អឹងខ្ចី និងឆ្អឹង subchondral ដែលជារោគសញ្ញាសំខាន់ៗនៃ OA [
18]។ ការឆ្លើយតបនៃការរមួលក្រពើដែលបង្កឡើងដោយអាស៊ីតអាសេទិកត្រូវបានចាត់ទុកយ៉ាងទូលំទូលាយថាជាការក្លែងធ្វើនៃការឈឺចាប់គ្រឿងកុំព្យូទ័រនៅក្នុងសត្វដែលការឈឺចាប់រលាកអាចត្រូវបានវាស់វែងជាបរិមាណ [
19]។ ខ្សែកោសិកាម៉ាក្រូហ្វាសកណ្ដុរ RAW264.7 ត្រូវបានគេប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយដើម្បីសិក្សាពីការឆ្លើយតបរបស់កោសិកាចំពោះការរលាក។ នៅពេលធ្វើឱ្យសកម្មជាមួយ LPS ម៉ាក្រូហ្វាស RAW264 ធ្វើឱ្យផ្លូវរលាកសកម្ម និងបញ្ចេញអន្តរការីរលាកជាច្រើន ដូចជា TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS និង IL-6 [
20]។ ការសិក្សានេះបានវាយតម្លៃពីផលប៉ះពាល់ប្រឆាំងនឹងការរលាក និងប្រឆាំងនឹងការរលាករបស់ A. lappa ប្រឆាំងនឹងជំងឺរលាកសន្លាក់ឆ្អឹង (OA) នៅក្នុងគំរូសត្វ MIA គំរូសត្វដែលបង្កឡើងដោយអាស៊ីតអាសេទិក និងកោសិកា RAW264.7 ដែលបានធ្វើឱ្យសកម្មដោយ LPS។
២. សម្ភារៈ និងវិធីសាស្រ្ត
២.១. សម្ភារៈរុក្ខជាតិ
ឫសស្ងួតរបស់ A. lappa DC. ដែលប្រើក្នុងការពិសោធន៍ត្រូវបានទិញពីក្រុមហ៊ុន Epulip Pharmaceutical Co., Ltd. (សេអ៊ូល ប្រទេសកូរ៉េ)។ វាត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយសាស្ត្រាចារ្យ Donghun Lee នាយកដ្ឋានឱសថសាស្ត្ររុក្ខជាតិ វរសេនីយ៍ឯកផ្នែកវេជ្ជសាស្ត្រកូរ៉េ សាកលវិទ្យាល័យ Gachon ហើយលេខគំរូប័ណ្ណត្រូវបានដាក់ជា 18060301។
២.២. ការវិភាគ HPLC នៃសារធាតុចម្រាញ់ពី A. lappa
A. lappa ត្រូវបានស្រង់ចេញដោយប្រើឧបករណ៍ច្រាលទឹក (ទឹកសាឌី ៣ ម៉ោង នៅសីតុណ្ហភាព ១០០°C)។ ដំណោះស្រាយដែលបានស្រង់ចេញត្រូវបានច្រោះ និងបង្រួមដោយប្រើម៉ាស៊ីនហួតសម្ពាធទាប។ សារធាតុចម្រាញ់ពី A. lappa មានទិន្នផល ៤៤,៦៩% បន្ទាប់ពីការសម្ងួតបង្កកក្រោម -៨០°C។ ការវិភាគក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីនៃ A. lappa ត្រូវបានធ្វើឡើងជាមួយ HPLC ដែលភ្ជាប់ដោយប្រើប្រព័ន្ធ 1260 InfinityⅡ HPLC (Agilent, Pal Alto, CA, USA)។ សម្រាប់ការបំបែកក្រូម៉ា ជួរឈរ EclipseXDB C18 (៤.៦ × ២៥០ ម.ម, ៥ មីក្រូម៉ែត្រ, Agilent) ត្រូវបានប្រើប្រាស់នៅសីតុណ្ហភាព ៣៥°C។ សំណាកសរុប ១០០ មីលីក្រាមត្រូវបានពនលាយក្នុងមេតាណុល ៥០% ចំនួន ១០ មីលីលីត្រ ហើយត្រូវបានបញ្ចេញសំឡេងរយៈពេល ១០ នាទី។ សំណាកត្រូវបានច្រោះជាមួយតម្រងសឺរាំង (Waters Corp., Milford, MA, USA) ទំហំ ០,៤៥ មីក្រូម៉ែត្រ។ សមាសធាតុដំណាក់កាលចល័តគឺ 0.1% អាស៊ីតផូស្វ័រ (A) និងអាសេតូនីទ្រីល (B) ហើយជួរឈរត្រូវបានច្រោះដូចខាងក្រោម៖ 0–60 នាទី, 0%; 60–65 នាទី, 100%; 65–67 នាទី, 100%; 67–72 នាទី, 0% សារធាតុរំលាយ B ជាមួយអត្រាលំហូរ 1.0 មីលីលីត្រ/នាទី។ ទឹកសំណល់ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅ 210 nm ដោយប្រើបរិមាណចាក់ 10 μL។ ការវិភាគត្រូវបានអនុវត្តជាបីដង។
២.៣. ការគ្រប់គ្រង និងការចិញ្ចឹមសត្វ
កណ្ដុរឈ្មោល Sprague–Dawley (SD) អាយុ 5 សប្តាហ៍ និងកណ្ដុរឈ្មោល ICR អាយុ 6 សប្តាហ៍ ត្រូវបានទិញពី Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do ប្រទេសកូរ៉េ)។ សត្វត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងបន្ទប់មួយដោយប្រើសីតុណ្ហភាពថេរ (22 ± 2 °C) និងសំណើម (55 ± 10%) និងវដ្តពន្លឺ/ងងឹត 12/12 ម៉ោង។ សត្វទាំងនោះត្រូវបានស្គាល់ស្ថានភាពនេះអស់រយៈពេលជាងមួយសប្តាហ៍មុនពេលការពិសោធន៍ចាប់ផ្តើម។ សត្វមានការផ្គត់ផ្គង់ចំណី និងទឹកតាមអំពើចិត្ត។ ច្បាប់សីលធម៌បច្ចុប្បន្នសម្រាប់ការថែទាំ និងការដោះស្រាយសត្វនៅសាកលវិទ្យាល័យ Gachon (GIACUC-R2019003) ត្រូវបានអនុវត្តយ៉ាងតឹងរ៉ឹងនៅក្នុងនីតិវិធីពិសោធន៍សត្វទាំងអស់។ ការសិក្សានេះត្រូវបានរចនាឡើងដោយការសាកល្បងដែលងងឹតភ្នែកដោយអ្នកស៊ើបអង្កេត និងស្របគ្នា។ យើងបានអនុវត្តតាមវិធីសាស្ត្រ euthanasia ស្របតាមគោលការណ៍ណែនាំរបស់គណៈកម្មាធិការសីលធម៌ពិសោធន៍សត្វ។
២.៤. ការចាក់ថ្នាំ MIA និងការព្យាបាល
កណ្តុរត្រូវបានបំបែកដោយចៃដន្យជា ៤ ក្រុម គឺក្រុមក្លែងក្លាយ ក្រុមត្រួតពិនិត្យ ក្រុមអ៊ីនដូមេតាស៊ីន និងក្រុម A. lappa។ កណ្តុរទាំងនោះត្រូវបានចាក់ថ្នាំសណ្ដំដោយល្បាយអ៊ីសូហ្វ្លុយអូរ៉ាន O2 2% ហើយត្រូវបានចាក់បញ្ចូល MIA ចំនួន 50 μL (40 mg/m2; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ទៅក្នុងសន្លាក់ជង្គង់ ដើម្បីនាំឱ្យមានជំងឺរលាកសន្លាក់ជង្គង់ដោយពិសោធន៍។ ការព្យាបាលត្រូវបានធ្វើឡើងដូចខាងក្រោម៖ ក្រុមត្រួតពិនិត្យ និងក្រុមក្លែងក្លាយត្រូវបានរក្សាតែជាមួយនឹងរបបអាហារមូលដ្ឋាន AIN-93G ប៉ុណ្ណោះ។ មានតែក្រុមអ៊ីនដូមេតាស៊ីនប៉ុណ្ណោះដែលត្រូវបានផ្តល់អ៊ីនដូមេតាស៊ីន (3 mg/kg) ដែលបញ្ចូលទៅក្នុងរបបអាហារ AIN-93G ហើយក្រុម A. lappa 300 mg/kg ត្រូវបានចាត់ឱ្យទៅរបបអាហារ AIN-93G ដែលបំពេញបន្ថែមជាមួយ A. lappa (300 mg/kg)។ ការព្យាបាលត្រូវបានបន្តរយៈពេល 24 ថ្ងៃចាប់តាំងពីថ្ងៃដែលបានបង្កើតជំងឺរលាកសន្លាក់ជង្គង់ក្នុងអត្រា 15-17 ក្រាមក្នុងទម្ងន់ខ្លួន 190-210 ក្រាមជារៀងរាល់ថ្ងៃ។
២.៥. ការវាស់វែងទម្ងន់ទ្រ
បន្ទាប់ពីការបង្កើត OA ការវាស់ស្ទង់សមត្ថភាពទ្រទម្ងន់នៃអវយវៈក្រោយរបស់សត្វកណ្តុរត្រូវបានអនុវត្តជាមួយ incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) តាមកាលវិភាគ។ ការចែកចាយទម្ងន់លើអវយវៈក្រោយត្រូវបានគណនា៖ សមត្ថភាពទ្រទម្ងន់ (%)
